在过去的几十年中,癌症免疫疗法极大地改变了肿瘤治疗领域。不过,虽然像检查点阻断等治疗方法可产生显著的临床反应,但其功效在癌症患者或癌症类型中并不均匀。由于肿瘤微环境的高度异质性和复杂性,需要对浸润淋巴细胞进行分析,以表征不同类型免疫细胞的众多基本特性,这些特性是癌症免疫疗法中许多未解决的问题的关键。
T细胞是一种淋巴细胞,在细胞介导的免疫调节中起重要作用。通过细胞表面上存在的T细胞受体,可以将T细胞与其他淋巴细胞(例如B细胞和天然杀伤细胞)区分开。大多数人类T细胞,称为αβT细胞,其细胞受体上的α和β链重排。九游会J9科技可提供T细胞受体库测序及生信分析,以T淋巴细胞为研究目标,采用靶向扩增技术获取TCR α&β的CDR3区域序列,并结合高通量测序技术和生物信息学分析手段,深度解析T细胞受体库的特征,为肿瘤、感染、自身免疫等免疫相关疾病的临床试验、创新性治疗等研究提供灵敏、精确、可靠的检测手段。
服务优势
服务流程
九游会J9经典案例
九游会J9科技根据客户所提供的样品,提取RNA,通过RACE等扩增方法,构建T细胞库,并通过高通量测序和后续的生物信息学分析,出具完整的T细胞组库分析报告。
结果展示:
(1) VDJ 基因参考序列比对
利用软件将每个样本测序得到的序列与数据库中记录的 VDJ 基因参考序列进行比对,根据比对结果去除无效的序列,包括未必对上、含终止密码子的序列。根据每条序列的比对结果,确定相应的 VDJ 基因的使用情况和具体的 CDR3 区域序列。
(2) VDJ 基因使用频率分析
Table 1 TRA样本中 V 基因使用频率统计
Gene_name | Chain type | Reads | Frequency |
---|---|---|---|
T21 | TRA | 158837 | 0.21722 |
T13-1 | TRA | 85909 | 0.117486 |
T9-2 | TRA | 81985 | 0.11212 |
T38-2/DV8 | TRA | 50525 | 0.069096 |
T4 | TRA | 37409 | 0.051159 |
T20 | TRA | 24028 | 0.03286 |
T2 | TRA | 23311 | 0.031879 |
T7 | TRA | 22040 | 0.030141 |
T12-1 | TRA | 19884 | 0.027193 |
T5 | TRA | 17587 | 0.024051 |
T1-2 | TRA | 16149 | 0.022085 |
… | … | … | … |
(3) CDR3 区域长度分析
(4) CDR3种类分析
Table2 TRA测序统计CDR3氨基酸序列长度
CDR3 | Reads | Frequency | len |
---|---|---|---|
DNNNDMR | 3560 | 0.004869 | 7 |
VISRTL | 1688 | 0.002308 | 6 |
AVTGNQFY | 1397 | 0.00191 | 8 |
AVDSNYQLI | 899 | 0.001229 | 9 |
AVNSGNTPLV | 847 | 0.001158 | 10 |
AVNRDDKII | 718 | 0.000982 | 9 |
AVEYGNKLV | 700 | 0.000957 | 9 |
AATDSWGKLQ | 696 | 0.000952 | 10 |
AVTSGSRLT | 690 | 0.000944 | 9 |
SRTL | 676 | 0.000924 | 4 |
AVQGGSEKLV | 661 | 0.000904 | 10 |
LVGDTGRRALT | 540 | 0.000738 | 11 |
… | … | … | … |
Table 3 TRA测序统计CDR3核酸序列长度
CDR3 | Reads | Frequency | len |
---|---|---|---|
GACAATAACAATGACATGCGC | 3560 | 0.004869 | 21 |
GTGATATCCAGAACCCTG | 1533 | 0.002096 | 18 |
TCCAGAACCCTG | 676 | 0.000924 | 12 |
GCTGTGGATAGCAACTATCAGTTAATC | 647 | 0.000885 | 27 |
GCTGTGGAATATGGAAACAAGCTGGTC | 644 | 0.000881 | 27 |
GCTGTGAACAGAGATGACAAGATCATC | 599 | 0.000819 | 27 |
GCTCTGAGTGACAATGACATGCGC | 513 | 0.000702 | 24 |
GCTCTGAGTGAATATGGAAACAAGCTGGTC | 507 | 0.000693 | 30 |
GCAGAGAGTTATAATGCAGGCAACATGCTCACC | 493 | 0.000674 | 33 |
GCTGTGAGTGGAGGCTTTGGGAATGTGCTGCAT | 487 | 0.000666 | 33 |
GCTGTGAGAGCCCCGACGTACAGCAGTGCTTCCAAGATAATC | 407 | 0.000557 | 42 |
… | … | … | … |
(5) 序列总长排序
Table4 TRB氨基酸序列总长reads数
氨基酸基因序列长度 | 氨基酸数目 | 丰度 |
---|---|---|
1491 | 147 | 0.096324 |
620 | 139 | 0.044324 |
540 | 143 | 0.040395 |
516 | 147 | 0.041955 |
496 | 141 | 0.043976 |
433 | 145 | 0.041868 |
366 | 109 | 0.041762 |
387 | 148 | 0.039055 |
504 | 143 | 0.042773 |
260 | 148 | 0.032298 |
(6) 样本测序饱和度分析
(7) V基因与J基因组合在两个样本内相同组合的差异,体现在相关序列的Reads数的变化
服务详情
服务名称 | 主要内容 | 分析软件 | 交付周期 | 交付项目 |
---|---|---|---|---|
T细胞抗体测序分析服务 | 测序数据挖掘; 抗体信息分析等 |
R, Python Software等 |
7~10天 | 分析报告 |
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